EmporeTM SDB-XC和C18固相萃取膜（47mm）應(yīng)用于水樣中去甲氯胺酮萃取

前言：

氯胺酮，全名為 2-鄰氯苯基-2-甲氨基環(huán)己酮，是苯環(huán)已哌啶（PCP）的衍生物。氯胺酮是一種通用的速效解離麻醉劑，被列為第一類精神藥品進(jìn)行管控[2,3]。

毒品犯罪會(huì)引發(fā)一系列的社會(huì)問題，例如為獲取毒資而引起的盜搶、殺人案件，又如吸毒產(chǎn)生幻覺后行為失控引起的暴力行為等，進(jìn)而對社會(huì)穩(wěn)定構(gòu)成極大的威脅。毒品犯罪也是各國政府嚴(yán)格防控的一類犯罪 [4]。

在本實(shí)驗(yàn)中，對比使用SDB-XC和C18兩種填料萃取膜（47mm）處理1升去甲氯胺酮加標(biāo)水樣，并用8mL甲醇進(jìn)行洗脫。然后通過LC-MS/MS分析。

1， 實(shí)驗(yàn)過程

1.1 儀器與試劑 

所有試劑均為分析純或更高。

去甲氯胺酮（1000μg/mL,甲醇），購自壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心；

甲醇（色譜純），購自賽默飛世爾科技（中國）有限公司；

純凈水，產(chǎn)自Milli-Q® EQ 7000系統(tǒng)，美國密理博Millipore公司；

EmporeTM固相萃取柱盤：SDB-XC（47mm，貨號(hào)：98-0604-0223-1），C18（47mm，貨號(hào)：98-0604-0217-3），均購自美國CDS公司；

Qprep 固相萃取裝置，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司；

液質(zhì)聯(lián)用儀：SCIEX Exion LC™液相系統(tǒng)+ Triple Quad™ 4500質(zhì)譜系統(tǒng)，SCIEX公司； 

1.2 工作液配制 

去甲氯胺酮使用溶液：100ng/mL，溶劑體系為甲醇；

1.3 實(shí)驗(yàn)

1.3.1 樣品制備  

將1000mL自來水樣品倒入1L樣品瓶，加入100μL去甲氯胺酮使用溶液（100ng/mL），加標(biāo)濃度為0.01ng/mL。

1.3.2 凈化與濃縮

分別將SDB-XC（47mm）和C18萃取膜，加載到Qprep固相萃取裝置，用10mL甲醇和10mL純水進(jìn)行活化，然后進(jìn)行上樣富集，上樣結(jié)束后，用8mL甲醇進(jìn)行洗脫。

洗脫液經(jīng)40℃氮吹濃縮至近干，加入乙腈+水（4+1）定容至1mL。洗脫液過0.22μm濾膜后，待LC-MS/MS分析。

1.3.3 LC-MS分析

LC條件：

色譜柱：Shim-pack Velox C18（2.7μm，2.1*100mm）；

柱溫：25℃；

進(jìn)樣量：5μL；

流動(dòng)相：

A:乙酸銨水溶液（20mmol/L），B: 乙腈（梯度洗脫程序見表1）；

流速：0.2mL/min；

MS條件：

IS電壓：5500V； 

氣簾氣CUR: 35 psi；

霧化氣GS1: 45 psi ；

輔助氣GS2: 45 psi；

離子源溫度: 400 ℃ ；

碰撞氣CAD:  9 psi；

檢測方式：正離子模式，多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。

去甲氯胺酮：

定量離子對238.1-125.1，

定性離子對238.1-179.1；

表1 液相色譜梯度洗脫條件

2, 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 

圖1 自來水空白總離子流圖

圖2 加標(biāo)總離子流圖（C18膜）

圖3 加標(biāo)總離子流圖（SDB-XC膜）

加標(biāo)回收率：

C18膜（47mm）: 89.4%；

SDB-XC膜（47mm）:69.8%。

3，結(jié)果與討論 

實(shí)驗(yàn)使用CDS-Empore^TM SDB-XC、C18不同填料膜片，對水樣中去甲氯胺酮進(jìn)行富集提取，并通過LC-MS/MS進(jìn)行定量，加標(biāo)濃度為0.01ng/mL（ppb）。實(shí)驗(yàn)表明：水樣中去甲氯胺酮的回收率分別為89.4%（C18膜）和69.8%（SDB-XC膜）。初步判定兩種膜均可用于自來水中痕量去甲氯胺酮的檢測分析。該分析方法的穩(wěn)定性有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

4，參考文獻(xiàn) （等線，標(biāo)題2，小四，加粗）

[1] Lygrisse J , Lapp M , Witherspoon K . Detection and quantification of ketamine HCl in alcohol/water matrices using ESI-MSn and LC-ESI-MS. Wichita State University. Graduate School, 2009.

[2] Singh P , Pratap K , Kinjavdekar P , et al. Xylazine, ketamine and their combination for lumbar epidural analgesia in water buffalo calves (Bubalus bubalis).[J]. Transboundary & Emerging Diseases, 2010, 53(8):423-431.

[3] Maddah B , Alimardani V , Moradifard H . A simple colorimetric kit for determination of ketamine hydrochloride in water samples[J]. Analytical Methods, 2015, 7(24):10.1039.C5AY01899D.

[4] Neufeld M , D Spence, Water T . Working in the dark: A hermeneutic inquiry into health professionals stories of ketamine sedation with children[J]. Contemporary Nurse, 2017:1.